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ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物...

如今檢查ELISA有很多路徑，咱們能夠依據(jù)自個(gè)的偏好進(jìn)行挑選。一般ELISA檢查的是酶促反響的可溶性產(chǎn)品，抗體上聯(lián)絡(luò)有相應(yīng)的酶（例如一般運(yùn)用的辣根過氧化物酶HRP），而反響系統(tǒng)中添加有相應(yīng)的底物（如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB）。ELISA試劑盒雖然有多種類型，不過它們都有一個(gè)一同特征，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲辦法包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cellELISA和酶聯(lián)免疫斑駁ELISPOT是兩種分外的類型，In-cellELISA需求將微孔板中培育...

洗板機(jī)是用于清洗酶標(biāo)板中殘留溶液的儀器，酶標(biāo)板是否清洗干凈是決定酶標(biāo)分析儀檢測(cè)結(jié)果是否正確的關(guān)鍵因素之一。它具有精密性、可靠性、自動(dòng)化程度高、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。一、洗板機(jī)的主要計(jì)量特性：①殘液量：≤2L/孔。②加液誤差：整板加液每孔300μL時(shí)，≤±5%。③加液重復(fù)性：整板加液每孔300μL時(shí)，CV≤5%。二、洗板機(jī)的校準(zhǔn)條件：①環(huán)境條件實(shí)驗(yàn)室溫度為(20±5)℃，室內(nèi)溫度變化≤1℃/h，無強(qiáng)電磁場(chǎng)干擾，無風(fēng)、無振動(dòng)，無強(qiáng)光直接照射，平坦、堅(jiān)固的檢測(cè)...

ELISA試劑盒的運(yùn)用關(guān)鍵：1、依照闡明書中標(biāo)明的時(shí)刻、加液的量及次序進(jìn)行溫育操作。2、運(yùn)用潔凈的塑料容器裝備洗滌液。運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。3、試劑應(yīng)按標(biāo)簽闡明書貯存，運(yùn)用前康復(fù)到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應(yīng)丟掉，不可保存。4、標(biāo)本因?yàn)槔洳貢r(shí)IgG聚組成多聚體，F(xiàn)ib非特異性吸附，重復(fù)凍融機(jī)械切力致使蛋白分子受損。5、試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，防止蛻變。6、運(yùn)用一次性的吸頭防止穿插污染，吸取停止液和底物A、B液時(shí)，防止運(yùn)用帶金屬部分的加樣器。...

ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，試驗(yàn)標(biāo)明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度?？乖贵w反響4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中過夜，以構(gòu)成較多的沉淀。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng)，在ELISA試劑盒中一般不予選用。ELISA試劑盒的保溫方法除有...

ELISA試劑盒測(cè)定值與文獻(xiàn)中相差太大怎么辦，下面看看我們來仔細(xì)說說：（1）生化測(cè)定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標(biāo)的變化。同時(shí)，要測(cè)定值，往往是很可能甚至不可能的。因此，追求的不是值而是相對(duì)值。（2）用不同測(cè)定方法和不同測(cè)定條件下得到的測(cè)定值可能存在很大差異。因此，如果測(cè)定方法不同，同一樣品的測(cè)定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測(cè)定的理由之一。因?yàn)椴煌髡哂猛辉噭┖袦y(cè)定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。（3）同一種材料，不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標(biāo)可...

ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法：1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-...