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羥脂酰輔酶A脫氫酶 ELISA 試劑盒

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  • 產(chǎn)品型號:A脫氫酶
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-02-29
  • 訪  問  量:939

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羥脂酰輔酶A脫氫酶 ELISA 試劑盒

定性測定
   定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應的強度,其實質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

在間接法和夾心法ELISA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。

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競爭法

競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下:

⑴將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。

⑵待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結(jié)合的機會,使酶標抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫后,酶標抗原與固相抗體的結(jié)合可達充分的量。洗滌。

⑶加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標抗原多,故顏色深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。一般情況,是通過方波伏安法,檢測培養(yǎng)體系的峰電流,通過峰電流與抗原抗體的線性關(guān)系來終確定體系的終檢測目標的濃度。

當抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結(jié)合。標本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標抗體愈少,因此陽性反應呈色淺于陰性反應。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,可采用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應的抗體,然后加入抗原,形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質(zhì),然后再加標本和酶標抗體進行競爭結(jié)合反應。競爭法測抗體有多種模式,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結(jié)合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結(jié)合,洗滌后再加入酶標抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反應??笻Be的檢測一般采用此法。

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